前言
小艾作为一个资深实验猿,曾为蛋白沉淀转移过程中的交叉污染而担心,也曾为液液萃取的耗时和基质干扰而忧虑,更曾为固相萃取步骤的繁琐而苦恼。但自从小艾知道了cleanert三部曲后,小艾的天空晴朗了:什么基质效应、什么deadline、什么复检,什么污染,小艾感觉统统no problem:
首曲ppt,无忧替代传统蛋白沉淀,简单、快速、适用于极性和非极性化合物
序曲sle,秒杀液液萃取,快速、有用、适用于中等极性和非极性化合物
终曲 mas,sle的黄金搭档,擅长解决sle解决不了的化合物
首曲:cleanert® ppt 96孔蛋白沉淀板
cleanert® ppt(protein precipitation plate) 96孔蛋白沉淀板产品采用高纯蛋白沉淀专用筛板,ph耐受范围广(ph 0-14),配合有机沉淀剂可有效完成蛋白沉淀,同时阻截蛋白沉淀过程中乙腈、甲醇等常用沉淀溶剂的穿透。在完成蛋白沉淀后,施加正压或负压收集流出液,从而实现血浆(或血清、尿液等)样品的高通量蛋白去除。该产品均匀无死孔,有效避免死吸附,兼容各种自动化、半自动化前处理装置,方便快捷,是一款适用于包括临床检测研究、药物动力学、新药研发在内的生物样品分析高通量前处理产品。
cleanert® ppt 96孔蛋白沉淀板
准备实验——将cleanert® ppt 96蛋白沉淀板放置于收集板上;
加入沉淀试剂——每孔加入不少于3倍样品体积的沉淀试剂,如乙腈或甲醇;
加入待处理样品——将待处理的血浆、血清等样品分别加入到蛋白沉淀板各孔中。
蛋白沉淀——将蛋白沉淀板放置于96位漩涡混合器上,调节转速到600-800转/min,充分混合5 min,然后静置5 min。
过滤——使用正压仪器如cleanert® m96生物样品前处理仪将沉淀后澄清溶液全部压入96孔接收板中(压力推荐为0.03-0.04 mpa,),盖上硅胶盖板后进样。
cleanert® ppt产品快速订购:
名称 | 规格 | 包装 | 订货号 |
cleanert®ppt蛋白沉淀板 | 2 ml/well | 2/pk | 96cd2025-q |
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序曲:cleanert sle产品
cleanert® sle 固相支持液液萃取产品,采用特殊工艺处理过的硅藻土,具有最大的比表面积和最低的表面活性,能够提供一个理想的液液分配的支撑表面,可以代替大部分传统的液液萃取方法。该方法可以应用于制药,药物代谢分析,生化分析,纺织业,食品,环境等多个领域。填料装填在spe 96孔板及柱管中,更容易实现萃取的自动化。与传统的液液萃取相比,仅需上样和淋洗两步就可完成萃取操作,具有更高的萃取效率和回收率,可避免乳化现象,萃取时间缩短一半以上。
样品预处理
为保证获取回收率,建议上样前对生物体液样品用等体积(1/1)稀释液进行稀释,可考虑的稀释剂为fa (1%、0.1%等)、水和氨水(如0.5m),目的是使目标物保持非离子化。
上样
将收集板与cleanert sle放置好,将经预处理的样品上样至sle中。
样品渗透
待样品完全浸润填料,静置5-10 min,使样品能均匀分配。
目标物洗脱
洗脱前需保证收集板已放置好。根据化合物的性质,选择合适的试剂洗脱目标物。cleanert sle实验最好在重力作用下自然滴落。将洗脱液浓缩后,使用流动相复溶,进样检测。
cleanert® sle产品快速订购:
名称 | 规格 | 包装 | 订货号 |
cleanert® sle硅藻土 硅藻土( 碱性小颗粒) | 200μl/well | 2/pk | hc2002sq-9w |
cleanert® sle硅藻土 硅藻土( 碱性小颗粒) | 300μl/well | 2/pk | hc3002sq-9w |
cleanert® sle硅藻土 硅藻土( 碱性小颗粒) | 500μl/well | 1/pk | hc5003sq-9dw |
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终曲:cleanert® mas 96孔磷脂去除板
mas (multi-function impurity adsorption spe),即”多重机制杂质吸附净化spe”,其操作方法类似于蛋白沉淀,但增加了多官能化的复合吸附材料,以离子交换、反相、氢键等机理去除生物样品中的主要内源性干扰物质磷脂,从而达到去除磷脂引起的基质效应的目的。
活化磷脂去除板
将cleanert® mas-b 96孔板与废液板放置于cleanert® m96生物样品前处理仪上;把0.5 ml乙腈加入各孔中,调节cleanert® m96生物样品前处理仪的压力,使乙腈流过磷脂去除板。继续加压,直至乙腈全部被吹干。
加入沉淀试剂
每孔加入不少于3倍样品体积的沉淀试剂,如乙腈、含1%甲酸的乙腈。
加入待处理样品,进行蛋白沉淀
将待处理的血浆、血清等样品分别加入到各孔中。然后将cleanert® mas-b磷脂去除板放置于96位漩涡混合器上,调节转速到600-800转/min,充分混合5 min。
过滤
使用正压仪器如cleanert® m96生物样品前处理仪将沉淀后的溶液全部压入96孔接收板中(压力推荐为0.03-0.04 mpa)。
氮气浓缩后复溶(可选)
收集得到的样品可直接用于上机测试;如目标物浓度低,需要进行浓缩定容时,可使用cleanert® v96氮吹浓缩仪吹干后加入流动相复溶。盖上96孔硅胶盖垫,漩涡混匀,用于仪器分析检测。
cleanert® mas-b磷脂去除产品快速订购:
名称 | 规格 | 包装 | 订货号 |
cleanert® mas-b磷脂去除96孔板 | 30mg/2ml/well | 2/pk | ms-b-0302w |
cleanert® mas-a磷脂去除96孔板 | 30mg/2ml/well | 2/pk | ms-a-0302w |
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