样品是从含低聚果糖物料体系中提取得到的。需要分离得到样品中的蔗果三糖、蔗果四糖、蔗果五糖等低聚糖。本实验建立一个制备纯化方法制备多种低聚果糖单体。
表1. 低聚果糖样品信息
样品名称 | 英文名 | 结构式 | 分子式 | 分子量 | cas编号 |
低聚果糖 | fructo oligosaccharide | 未知 | 未知 | 未知 | 未知 |
实验部分
仪器、试剂与材料
主要仪器设备
cheetah hp100 高压制备仪器，蒸发光散射检测器
试剂材料
乙腈为色谱纯； 水为去离子水
高效液相色谱柱：venusil hilic 10 μm，100 å，300 g
低聚果糖样品：客户提供
样品前处理
样品是白色粉末，取3 g 样品用5 ml 水超声溶解，用0.22 μm 滤膜过滤后上样
制备条件
色谱柱：venusil hilic 10 μm，100 å，300 g 填装于50 mm 内径dac 中；
流动相：a：水 b：乙腈；
检测器：elsd 70 ℃
流 速：80 ml/min
进样量：5 ml
梯 度：
表2. 液相色谱梯度洗脱条件
时间/min | 流速/(ml/min) | a/% | b/% |
0.0 | 80.0 | 23.0 | 77.0 |
180.0 | 80.0 | 23.0 | 77.0 |
检测条件
色谱柱：venusil hilic 5 μm，100 å ，4.6 × 250 mm；
流动相：a：水b：乙腈
检测器：elsd 60 ℃
流 速：1.0 ml/min
进样量：5 μl
柱 温：30 ℃
梯 度：
表3. 液相色谱梯度洗脱条件
时间/min | 流速/(ml/min) | a/% | b/% |
0.0 | 1.0 | 10.0 | 90.0 |
20.0 | 1.0 | 50.0 | 50.0 |
30.0 | 1.0 | 50.0 | 50.0 |
结果与讨论
本实验采用venusil hilic (10 μm，100 å，300 g)对低聚果糖样品进行了制备，由表2 及图1 可知，流动相为水和乙腈，进行梯度洗脱时，样品通过制备，峰形良好，所得产物纯度满足客户需求。
图1. 制备色谱图
图2. 样品检测色谱图
图3. 空白图谱
图4. 15min 接收液检测图谱
图5. 22min 接收液检测图谱
图6. 34min 接收液检测图谱
图7. 40-47min 接收液检测图谱
图8. 53-64min 接收液检测图谱
图9. 73-85min 接收液检测图谱
图10. 105-117min 接收液检测图谱
图11. 140-160min 接收液检测图谱
结论
本实验采用venusil hilic (10 μm，100 å，300 g)色谱柱对低聚果糖进行了制备。结果表明venusil hilic 填料对该样品分离效果良好，所得产物纯度能够满足客户要求。
附：相关产品
产品名称 | 规格 | 包装数量 | 订货号 |
venusil hilic | 10 µm 100 å 100 g/瓶 | 1瓶 | vh900100-0 |
venusil hilic | 5 µm 100 å 4.6×250 mm | 1支 | vh952505-0 |
1.5 ml样品瓶 | 短螺纹透明带书写处 32 × 11.6 mm | 100/pk | 1109-0519 |
1.5 ml样品瓶盖 | 9 mm中心孔蓝盖，红色橡胶/米色ptfe隔垫 45°shore a; 1.0 mm | 100/pk | 0915-1819 |
一次性注射器 | 2 ml无针头 | 100支/包 | lzsq-2ml |
液相进样针 | 20 µl，平头 | 1支/盒 | jyz-20ul |
乙腈 | 4 l/瓶，hplc级 | 4 × 4 l/箱 | ah015-4 |
针筒过滤器 | 0.22 µm 13 mm 单膜 | 200个/包 | as011320 |
应用编号：pp10078
