某些盐类样品，分析条件下保留及分离良好，但放大到制备条件后就不保留，这是个比较普遍的问题。如本实验中环糊精类羧酸钠盐样品，极性较强，在十八烷基键合硅胶制备柱上没有保留，通过酸处理后，使其脱离盐的形式，后保留及分离良好。
表1. 某磷酸酯样品信息
样品名称 | 结构式 | 分子式 | 分子量 |
磷酸酯 | c12h18p2o7n4s | 424 |
实验部分
仪器、试剂与材料
主要仪器设备
cheetah® hp-100 和cheetah® mp-200 制备液相
试剂材料
去离子水、乙腈和碳酸氢铵为色谱纯；
高效液相色谱柱：venusil mp c18 10 μm，100 å，10 × 250 mm
某磷酸酯样品：客户提供
样品前处理
称取50 mg 样品，加2 ml（1%tfa）水溶解，0.22 um 尼龙滤膜过滤。
制备条件1
色谱柱：venusil mp c18 10 μm，100 å，10 × 250 mm；
流动相：去离子水（80mm 碳酸氢铵）
检测器：235 nm
流速：4 ml/min
进样量：20 mg
等度：
表2. 液相色谱等度洗脱条件
时间/min | 流速/(ml/min) | 水（80mm碳酸氢铵）/% |
0.0 | 4.0 | 100.0 |
20.0 | 4.0 | 100.0 |
制备条件2
色谱柱：aq c18 20-35 μm，100 å，12g flash 柱2 支串联；
流动相：去离子水（80mm 碳酸氢铵）
检测器：235 nm
流速：8 ml/min
进样量：20 mg
等度：
表3. 液相色谱等度洗脱条件
时间/min | 流速/(ml/min) | 水（80mm碳酸氢铵）/% |
0.0 | 8.0 | 100.0 |
20.0 | 8.0 | 100.0 |
检测条件
色谱柱：innoval ods-2 10 μm，100 å，4.6 × 250 mm；
流动相：a：去离子水（80mm 碳酸氢铵） b：乙腈；
检测器：235 nm
流速：1 ml/min
柱温：25℃
进样量：20 μl
等度：
表4. 液相色谱等度洗脱条件
时间/min | 流速/(ml/min) | a/% | b/% |
0.0 | 1.0 | 95.0 | 5.0 |
20.0 | 1.0 | 95.0 | 5.0 |
结果与讨论
本实验分别采用mp c18（10 μm，100 å，10 × 250 mm）填料和aq c18 (20-35um，100 å，12g）对某磷酸酯样品进行了制备，由表2、表3、及图1、图2 可知，流动相为去离子水（含80mm 碳酸氢铵），进行等度洗脱时，样品通过制备，峰形良好，所得产物纯度满足客户需求。
图1. mp c18 (10 um）制备色谱图（收集9.1-9.9min 馏分）
图2. aq c18（20-35um）制备色谱图（收集8.9-11.6min 馏分）
图3. 制备馏分检测色谱图
图4. 原样检测色谱图
结论
本实验中某磷酸酯样品，极性较强，在十八烷基键合硅胶制备柱上保留很弱，选用亲水的aq c18，流动相采用纯水相则有保留且分离良好。
本实验采用mp c18 (10 μm，100 å，10 × 250 mm)色谱柱和aq c18(20-35um，100 å，12g）对某磷酸酯样品进行了纯化。结果表明亲水aq c18 填料对该样品分离效果良好，所得产物纯度能够满足客户要求。
附：相关产品
产品名称 | 规格 | 包装数量 | 订货号 |
venusil mp c18 | 10 µm 100 å 10 × 250 mm | 1支 | va902510-0 |
aq c18 | 20-35 µm 100 å 12g | 20支 | sq230012-0 |
1.5 ml样品瓶 | 短螺纹透明带书写处 32 × 11.6 mm | 100/pk | 1109-0519 |
1.5ml样品瓶盖 | 9 mm中心孔蓝盖，红色橡胶/米色ptfe隔垫 45°shore a; 1.0 mm | 100/pk | 0915-1819 |
一次性注射器 | 2 ml无针头 | 100支/包 | lzsq-2ml |
液相进样针 | 20 µl，平头 | 1支/盒 | jyz-20ul |
乙腈 | 4 l/瓶，uv级 | 4 × 4 l/箱 | ah015-4 |
针筒过滤器 | 0.22 µm 13 mm 单膜 | 200个/包 | as011320 |
应用编号：pp10039
