淫羊藿,为小檗科植物心叶淫羊藿,主要含黄酮类化合物、木脂素、生物碱、挥发油等,其中淫羊藿糖甙(epimedoside)a、b、c,为其主要要用成分,具有很高的药用价值。主治功能有补肾阳,强筋骨,祛风湿。 本实验建立一个分离方法将此活性成分分离。
表1. 淫羊藿样品信息
样品名称 | 英文名 | 结构式 | 分子式 | 分子量 | cas编号 |
淫羊藿苷 | lcariln | c33h40o15 | 676.66 | 489-32-7 |
实验部分
仪器、试剂与材料
主要仪器设备
agela lc-10f 高压制备仪器
试剂材料
乙腈为色谱纯; 水为去离子水
高效液相色谱柱:venusil xbp c18(2) 5 μm,100 å,10 × 250 mm
淫羊藿样品:客户提供
样品前处理
样品是棕黄色粉末,取20 mg 样品用甲醇稀释至4 ml,用0.22 μm 滤膜过滤后上样
制备条件
色谱柱:venusil xbp c18(2) 5 μm,100 å,10 × 250 mm;
流动相:a:水 b:乙腈;
检测器:270 nm
流 速:4 ml/min
进样量:20 mg
梯 度:
表2. 液相色谱梯度洗脱条件
时间/min | 流速/(ml/min) | a/% | b/% |
0.0 | 4.0 | 70.0 | 30.0 |
30.0 | 4.0 | 70.0 | 30.0 |
检测条件
色谱柱:venusil xbp c18 5 μm,100 å,4.6 × 250 mm;
流动相:a:水 b:乙腈;
检测器:270 nm
流 速:1 ml/min
进样量:5 μl
梯 度:
表3. 液相色谱梯度洗脱条件
时间/min | 流速/(ml/min) | a/% | b/% |
0.0 | 1.0 | 70.0 | 30.0 |
30.0 | 1.0 | 70.0 | 30.0 |
结果与讨论
本实验采用venusil xbp c18(2) (5 μm,100 å,10 × 250 mm)对淫羊藿苷进行了制备,由表2 及图1 可知,流动相为水和乙腈,进行洗脱时,样品通过制备,峰形良好,所得产物纯度满足客户需求。
图1. 制备色谱图
图2. 制备产物检测色谱图
结论
本实验采用venusil xbp c18(2) (5 μm,100 å,10 × 250 mm)色谱柱对淫羊藿苷进行了制备。结果表明xbp c18(2)填料对该样品分离效果良好,所得产物纯度能够满足客户要求。
附:相关产品
产品名称 | 规格 | 包装数量 | 订货号 |
venusil xbp c1(2) | 5 µm 100 å 10 × 250 mm | 1支 | vx952510-2 |
venusil xbp c18 | 5 µm 100 å 4.6 × 250 mm | 1支 | vx952505-0 |
1.5 ml样品瓶 | 短螺纹透明带书写处 32 × 11.6 mm | 100/pk | 1109-0519 |
1.5ml样品瓶盖 | 9 mm中心孔蓝盖,红色橡胶/米色ptfe隔垫 45°shore a; 1.0 mm | 100/pk | 0915-1819 |
一次性注射器 | 2 ml无针头 | 100支/包 | lzsq-2ml |
液相进样针 | 20 µl,平头 | 1支/盒 | jyz-20ul |
乙腈 | 4 l/瓶,hplc级 | 4 × 4 l/箱 | ah015-4 |
针筒过滤器 | 0.22 µm 13 mm 单膜 | 200个/包 | as011320 |
应用编号:pp10062