前言
氨基酸样品的普遍检测方法都是衍生化后检测。在实际研究过程中，在动物提取物蛋白水解后，测试其中的氨基酸组成，有可能需要采用非衍生化的方法进行制备，将各个氨基酸分别进行鉴定等工作。本实验建立的制备纯化方法尝试使用简单的流动相体系实现分离，避免使用衍生化等破坏性操作。
实验部分
仪器、试剂与材料
主要仪器设备
lc-10f高压半制备仪器，
试剂材料
水为去离子水，乙腈为制备级
色谱柱：venusil asb c18（5 µm，150 å，10×250 mm）
氨基酸样品：客户提供
样品前处理
样品是无色溶液状态，用0.22 µm滤膜过滤后直接上样
制备条件
色谱柱：venusil asb c18（5 µm, 150 å, 10×250 mm）；
流动相：a：5 mm七氟丁酸 0.7%tfa水溶液；b：乙腈；
检测器：elsd 85 ℃，gas flow：2.0 nl/min；
流 速：4 ml/min；
进样量：20 µl；
梯 度：
表1. 液相色谱梯度洗脱条件
时间/min | 流速/(ml/min) | a/% | b/% |
0.0 | 4.0 | 100.0 | 0.0 |
5.0 | 4.0 | 90.0 | 10.0 |
8.0 | 4.0 | 85.0 | 15.0 |
25.0 | 4.0 | 65.0 | 35.0 |
结果与讨论
本实验采用venusil asb c18（5 µm, 150 å, 10×250 mm）对氨基酸样品进行了分离，由表1及图1可知，流动相为5 mm七氟丁酸 0.7%tfa水溶液和乙腈，进行梯度洗脱时，样品分离良好。
图1. 制备色谱图
结论
本实验采venusil asb c18（5 µm, 150 å, 10×250 mm）色谱柱对氨基酸样品进行了制备。venusil asb c18使用非衍生化的方法分离氨基酸分离效果良好，能够初步分离样品。
附：相关产品
产品名称 | 规格 | 包装数量 | 订货号 |
venusil asb c18 | 5 µm 150 å 10×250 mm | 1支 | vs952510-0 |
1.5 ml样品瓶 | 短螺纹透明带书写处 32 × 11.6 mm | 100/pk | 1109-0519 |
1.5 ml样品瓶盖 | 9 mm中心孔蓝盖，红色橡胶/米色ptfe隔垫45°shore a; 1.0 mm | 100/pk | 0915-1819 |
一次性注射器 | 2 ml无针头 | 100支/包 | lzsq-2ml |
液相进样针 | 20 µl，平头 | 1支/盒 | jyz-20ul |
针筒过滤器 | 0.22 µm 13 mm 单膜 | 200个/包 | as011320 |
应用编号：pp10092