前言
氯丙醇是丙三醇上的羟基被氯取代所产生的一类化合物，包括单氯丙二醇：3-氯-1,2-丙二醇(简称3-氯丙醇，3-mcpd)，2-氯-1,3-丙二醇(2-mcpd)和双氯丙醇：1,3-二氯-2-丙醇(1,3-dcp)，2,3-二氯-1-丙醇（2,3-dcp）。在氯丙醇系列化合物中，污染食品的主要成分是3-mcpd。如果在生产酱油中用了添加盐酸的方法来加速生产，这会导致产品中氯丙醇含量偏高，对人体有害，会影响人的健康。
本文通过重现国标，建立了酱油中3-mcpd的前处理方法，该方法简便且稳定性较好。
实验部分
仪器、试剂与材料
主要仪器设备
气相色谱串联质谱仪
试剂材料
正己烷、乙酸乙酯为色谱纯；氯化钠、无水硫酸钠均为分析纯；
七氟丁酰基咪唑衍生剂；
3-mcpd标准品（纯度99%）：乙酸乙酯溶解；
d5-3-mcpd内标溶液：乙酸乙酯溶解；
cleanert mcpd：最大上样量5 ml。
样品制备
样品提取
称取酱油样品4 g于50 ml离心管中，加入0.8 μg/ml的d5-3-mcpd内标40 μl，超声5 min混匀，待净化。
样品净化
将上述待净化液上样于cleanert mcpd氯丙醇专用柱上，平衡10 min。用10 ml正己烷淋洗，弃去流出液，抽干小柱。再用15 ml乙酸乙酯洗脱，收集洗脱液于30℃氮吹至约0.5 ml，用正己烷定容至2 ml，待衍生化。
衍生化
向上述的待衍生化溶液中加入0.04 ml的七氟丁酰基咪唑，立即密塞，涡旋混合30 s，于70℃保温20 min。取出冷却至室温，加入2 ml 20%氯化钠溶液，涡旋混合1 min，静置分层，且水相澄清。转移上层正己烷层，加入约0.3 g的无水硫酸钠进行除水，转移上清液至样品瓶中，待检测。
实验条件
色谱柱：da-5ms色谱柱，30 m × 0.25 mm × 0.25 µm；
进样口温度：250℃；柱温：初始温度50℃，保持1 min，以2℃/min 升至90℃，再以40℃/ min升至270℃ 保持5 min；
载气：氦气，纯度≥99.999％；
流速：1 ml/min；
电离方式：ei源；
离子源温度：250℃；
溶剂延迟：5 min；
进样方式：不分流进样；
样量：1 µl；
监测方式：选择离子扫描（sim）。
表1. 16种邻苯二甲酸酯监测离子参数
物质名称 | 定性离子（m/z） | 定量离子（m/z） |
3-mcpd衍生物 | 275、289、291 | 253 |
结果与讨论
实验结果
由表2可知，采用固相萃取结合gc-ms的方法检测酱油中的3-mcpd，加标回收率在90%以上，能够满足标准要求。由图1、图2、图3可知，用da-5ms色谱柱检测3-mcpd，峰型和保留时间与国标差距不大。
表2. 酱油中3-mcpd加标回收实验结果(添加水平0.02 mg/kg，n=3)
物质名称 | 保留时间/min | 平均回收率/% | 变异系数/% |
3-mcpd衍生物 | 14.990 | 91.0 | 3.9 |
图1. 0.04 µg/ml 3-mcpd衍生物与内标衍生物标准溶液色谱图
图2. 酱油基质空白色谱图
图3. 酱油基质0.02 mg/kg加标色谱图
结论
本实验重现gb5009.191-2016食品中氯丙醇测定的国家标准，用cleanert mcpd小柱结合气相色谱串联质谱的方法对酱油中的3-mcpd进行了测定。对于加标量为0.02 mg/kg的样品，加标回收率在91.0%，符合检测要求，且变异系数小于10%，稳定性良好。说明cleanert mcpd小柱能够用于酱油中3-mcpd的检测。
附：相关产品
产品名称 | 规格描述 | 包装数量 | 订货号 |
cleanert mcpd | 最大上样量5 ml | 15支/包 | lbc500030 |
da-5ms | 30 m × 0.25 mm × 0.25 µm | 1支 | 1525-3002 |
1.5 ml样品瓶 | 短螺纹透明带书写处 32 × 11.6 mm | 100/pk | 1109-0519 |
1.5 ml样品瓶盖 | 9 mm中心孔蓝盖，红色橡胶/米色ptfe隔垫 45°shore a; 1.0 mm | 100/pk | 0915-1819 |
氮吹仪 | 15位 | 1台 | nv15-g |
应用编号：af10158
