(1) 样品提取及净化
1.1 红辣椒粉等粉状样品
称取1g～5g(准确至0.001g)样品于三角瓶中，加入10ml～30ml正己烷，超声5min，过滤，用10ml正己烷洗涤残渣数次，至洗出液无色，合并正己烷液，用旋转蒸发仪浓缩至5ml以下，慢慢加入cleanert alumina-n柱中，为保证层析效果，在柱中保持正己烷液面为2mm左右时上样，在全程的层析过程中不应使柱干涸，用正己烷少量多次淋洗浓缩瓶，一并注入层析柱。控制氧化铝表层吸附的色素带宽宜小于0.5cm，待样液完全流出后，视样品中含油类杂质的多少用10ml～30ml正己烷洗柱，直至流出液无色，弃去全部正己烷淋洗液，用含5%丙酮的正己烷液60ml洗脱，收集、浓缩后，用丙酮转移并定容至5ml，经0.45μm滤器过滤后待测。
1.2 红辣椒油、火锅料、奶油等油状样品
称取0.5g～2g(准确至0.001g)样品于小烧杯中，加入适量正己烷溶解(约1ml～10ml)，难溶解的样品可于正己烷中加温溶解。按1.1中“慢慢加入到cleanert alumina-n柱中……过滤后待测”操作。
1.3 辣椒酱、番茄沙司等含水量较大的样品称取10g～20g(准确至0.01g)样品于离心管中，加10ml～20ml水将其分散成糊状，含增稠剂的样品多加水，加入30ml正己烷：丙酮 = 3：1，匀浆5min，3000rpm离心10min，吸出正己烷层，于下层再加入20ml×2次正己烷匀浆，离心，合并3次正己烷，加入无水硫酸钠5g 脱水，过滤后于旋转蒸发仪上蒸干并保持5分钟，用5ml正己烷溶解残渣后，按1.1中“慢慢加入到cleanert alumina-n柱中……过滤后待测”操作。
1.4 香肠等肉制品
称取粉碎样品10g～20g(准确至0.01g)于三角瓶中，加入60ml正己烷充分匀浆5min，滤出清液，再以20ml×2次正己烷匀浆，过滤。合并3次滤液，加入5g无水硫酸钠脱水，过滤后于旋转蒸发仪上蒸至5ml以下，按1.1中“慢慢加入到cleanert alumina-n柱中……过滤后待测”操作。
(2) 检测方法
色谱柱： venusil asb c18 4.6mm×150mm 3μm
流动相：溶剂a ：0.1%甲酸的水溶液：乙腈 = 85：15 溶剂b： 0.1%甲酸的乙腈溶液：丙酮=80：20
梯度洗脱：流速：1ml/min 柱温：30℃ 检测波长：苏丹红ⅰ 478nm ；苏丹红ⅱ、苏丹红ⅲ、苏丹红ⅳ 520nm ；于苏丹红ⅰ出峰后切换。进样量：10μl。梯度条件见表1。
表1 流动相梯度条件:
流动相 | |||
时间(min) | a% | b% | 曲线 |
0 | 25 | 75 | 线性 |
10 | 25 | 75 | 线性 |
25 | 0 | 100 | 线性 |
32 | 0 | 100 | 线性 |
35 | 25 | 75 | 线性 |
40 | 25 | 75 | 线性 |
(3) 订货信息:
产品名称 | 规格包装 | 订货号 |
lc-10f高效液相色谱仪 | 10ml/min, 梯度系统,200-800nm双波长检测器 | fl-lc010gs |
cc-100分析型色谱柱温箱 | 温控范围：5-70℃可安装1-2支300mm色谱柱 | cc-100 |
cleanert alumina-n固相萃取柱 | 4g/12ml, 20支/pk | al400012-n |
venusil asb c18液相色谱柱 | 4.6mm×150mm, 3μm | vs931505-0 |
针式过滤器(ptfe) | 0.22μm,直径13mm,200/pk | as041320 |
一次性无针头注射器 | 5ml, 100/pk | zsq-5ml |
1.5ml样品瓶 | 短螺纹透明带书写32×11.6mm, 100/pk | 1109-0519 |
1.5ml样品瓶盖 | 9 mm中心孔蓝盖，红色橡胶/米色ptfe隔垫,45．shore a 1.0mm,100/pk | 0915-1819 |
正己烷 | 4×4l/瓶 | ah216-4 |
注：由于有些样品，基质干扰严重，如辣椒油、火锅油等，需要使用4g/12ml 的规格，才能有较好的回收率，具体方法可咨询400-
606-8099”。
具体请参考：gb/t 19681-2005 食品中苏丹红染料的检测方法 高效液相色谱法
应用编号：af10049
