前言
齐墩果酸是五环三萜类化合物，以游离体和配糖体的形式存在于多种植物中。齐墩果酸是白色针晶（乙醇）；无臭，无味，可溶于甲醇、乙醇、苯、乙醚、丙酮和氯仿，几乎不溶于水，对酸碱均不稳定。齐墩果酸主要具有护肝降酶、促进肝细胞再生、抗炎、强心、利尿、抗肿瘤等作用，还具有降血糖、降血脂、镇静的作用，是开发治疗肝病和降血糖等药物有效成分。熊果酸是存在于天然植物中的一种三萜类化合物，具有镇静、抗炎、抗菌、抗糖尿病、抗溃疡、降低血糖等多种生物学效应，因而被广泛地用作医药和化妆品原料。
表1. 齐墩果酸、熊果酸样品信息
样品名称 | 英文名 | 结构式 | 分子式 | 分子量 | cas编号 |
齐墩果酸 | oleanolic acid |
| c30h48o3 | 456.71 | 508-02-1 |
熊果酸 | ursolic acid |
| c30h48o3 | 456.71 | 77-52-1 |
实验部分
仪器、试剂与材料
试剂材料
纯水(屈臣氏)；甲醇、乙腈、无水乙醇均为色谱纯；乙酸铵为分析纯；
熊果酸对照品：0.2 mg/ml，由agela laboratory 提供；
枇杷叶：客户提供；
高效液相色谱柱：venusil xbp c18（l）；5 μm，150 å；4.6×250 mm。
样品制备
对照品溶液的制备：取熊果酸对照品适量，加乙醇制成每1 ml含熊果酸0.2 mg的溶液，备用；
供试品溶液的制备：取本品粗粉约1.0 g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入乙醇50 ml，称定重量，超声处理30 min，放冷，称定重量，加乙醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，备用。
色谱条件
色谱柱：venusil xbp c18（l）；5 μm，150 å；4.6×250 mm；
流动相：乙腈︰甲醇︰0.5%乙酸铵溶液（67︰12︰21, v/v/v）；
波长：210 nm；
流速：1.0 ml/min；
柱温：30℃；
进样量：10 ul。
结果与讨论
本实验采用venusil xbp c18（l）色谱柱对枇杷叶中齐墩果酸、熊果酸两种物质进行了测定。由表2和图1、2可知，流动相为乙腈︰甲醇︰0.5%乙酸铵溶液（67︰12︰21, v/v/v），等度洗脱，能够使齐墩果酸和熊果酸达到良好的分离。
表2. 枇杷叶中齐墩果酸、熊果酸测试结果
样品名称 | 化合物名称 | 保留时间/min | 理论塔板数 | 拖尾因子 | 分离度 |
对照品 | 熊果酸 | 16.584 | 20263 | 0.91 | — |
供试品 | 齐墩果酸 | 15.708 | 21260 | 0.97 | — |
熊果酸 | 16.602 | 21016 | 0.92 | 2.01 |
图1. 熊果酸对照品高效液相色谱图
图2. 枇杷叶供试品高效液相色谱图
结论
本实验使用venusil xbp c18（l）色谱柱(5 μm；150 å；4.6×250 mm)，按照客户提供的检测标准，对枇杷叶中齐墩果酸、熊果酸进行了测定，色谱柱分离效果良好，理论塔板数以熊果酸计算为21016>5000，能够满足检测要求。
附：相关产品
产品名称 | 规格描述 | 包装数量 | 订货号 |
venusil xbp c18（l） | 5 μm,150 å, 4.6×250 mm | 1支 | vx952505-l |
分析型色谱柱温箱 | 室温 5-50℃，箱内一对夹套 | 1个 | cc-100 |
保护柱套 | 适用于4.6×10mm和2.1×10mm | 1支 | sh-100 |
直联式保护柱芯 | 5 μm，150å；4.6×10mm | 4 /pk | vx950105-ls |
1.5 ml样品瓶 | 短螺纹透明带书写处 32×11.6 mm | 100/pk | 1109-0519 |
1.5ml样品瓶盖 | 9 mm中心孔蓝盖，红色橡胶/米色ptfe隔垫 45°shore a; 1.0 mm | 100/pk | 0915-1819 |
针式过滤器 | 单膜，13 mm，0.45 μm | 100个/包 | as021345 |
一次性注射器 | 2 ml无针头 | 100支/包 | lzsq-2ml |
乙腈 | 4 l/瓶，色谱纯 | 4×4 l/箱 | ah015-4 |
甲醇 | 4 l/瓶，色谱纯 | 4×4 l/箱 | ah230-4 |
应用编号：ap10116
