样品中是小分子合成产物。样品中含有一未知强杂质，需要建立一个合适的分离方法来制备出该杂质以便做结构鉴定。
表1.样品信息
结构式 | 分子式 | 分子量 |
 | c10h9no5 | 223.18 |
实验部分
仪器、试剂与材料
主要仪器设备
agela lc-10f 高压半制备仪器
试剂材料
乙腈为色谱纯；屈臣氏蒸馏水
制备色谱柱：innoval ods-2（10 μm，100 å，10×250 mm）
苯甲酸类衍生物：客户提供
样品前处理
样品是黄色粉末状固体，取100 mg 样品用乙腈：甲醇=1:1 稀释至2 ml，用0.22 μm滤膜过滤后上样
制备条件
色谱柱：innoval ods-2（10 μm，100 å，10×250 mm）；
流动相：a：0.05%tfa 水溶液 b ：乙腈；
检测器：230 nm
流 速： 4.0 ml/min
进样量：5 mg
表2. 高压制备色谱梯度洗脱条件
时间/min | 流速/(ml/min) | a/% | b/% |
0.0 | 4.0 | 75.0 | 25.0 |
20.0 | 4.0 | 62.0 | 38.0 |
检测条件
色谱柱：innoval ods-2（5 μm，100 å，10×250 mm）；
流动相：a：0.05%tfa 水溶液 b ：乙腈；
检测器：230 nm
流速：1 ml/min
进样量：20 μl
表3. 液相检测梯度洗脱条件
时间/min | 流速/(ml/min) | a/% | b/% |
0.0 | 1.0 | 90.0 | 10.0 |
20.0 | 1.0 | 60.0 | 40.0 |
结果与讨论
本实验采用innoval ods-2（10 μm，100 å，10×250 mm）对该样品进行了制备，由图1 可知，流动相为0.05%tfa 水溶液和乙腈，进行梯等度洗脱时，样品通过制备，峰形良好，且与其他峰分离度较好，所得产物纯度满足客户求。
图1. 制备色谱图（收集15.9、17.2 min 两峰）
图2. 两峰接收液检测色谱图
结论
本实验采用innoval ods-2（10 μm，100 å，10×250 mm）半制备柱对该金属配合物样品进行了制备。结果表明innoval ods-2 填料对该样品分离效果良好，所得产物纯度能够满足客户要求。
附：相关产品
产品名称 | 规格 | 包装数量 | 订货号 |
innoval ods-2 | 10 µm 100 å 10×250 mm | 1支 | ix902510-2 |
innoval ods-2 | 5 µm 100 å 4.6 × 250 mm | 1支 | ix952505-2 |
1.5 ml样品瓶 | 短螺纹透明带书写处 32 × 11.6 mm | 100/pk | 1109-0519 |
1.5ml样品瓶盖 | 9 mm中心孔蓝盖，红色橡胶/米色ptfe隔垫 45°shore a; 1.0 mm | 100/pk | 0915-1819 |
一次性注射器 | 2 ml无针头 | 100支/包 | lzsq-2ml |
液相进样针 | 20 µl，平头 | 1支/盒 | jyz-20ul |
乙腈 | 4 l/瓶，hplc级 | 4 × 4 l/箱 | ah015-4 |
针筒过滤器 | 0.22 µm 13 mm 单膜 | 200个/包 | as011320 |
应用编号：pp10030
