样品信息
表1. 氟虫腈及其代谢物样品信息
样品名称 | 英文名 | 结构式 | 分子式 | 分子量 | cas编号 |
氟虫腈 | fipronil |
| c12h4cl2f6n4os | 437.15 | 120068-37-3 |
氟甲腈 | fipronil-desulfinyl |
| c12h4cl2f6n4 | 389.09 | 205650-65-3 |
氟虫腈砜 | fipronil-sulfone |
| c12h4cl2f6n4o2s | 453.15 | 120068-36-2 |
氟虫腈亚砜 | fipronil-sulfide |
| c12h4cl2f6n4s | 421.15 | 120067-83-6 |
实验部分
仪器、试剂与材料
主要仪器设备
sciex api 4000 液相色谱串联质谱仪。
试剂材料
乙腈为色谱纯；氯化钠为优级纯； 冰乙酸为分析纯；
氟虫腈及其代谢物混合标准工作溶液（纯度99%）：甲醇溶解；
1%乙酸乙腈溶液：准确量取1 ml乙酸，加乙腈定容至100 ml；
cleanert pep plus：60 mg/3 ml。
前处理方法
样品提取
称取5 g均匀的样品，置于50 ml离心管中，加入5 ml水，手动振荡使样品分散，再加入10 ml 1%乙酸乙腈（v/v），超声提取10 min，加入3 g氯化钠，手动摇匀后以8000 r/min离心5 min，上清液待净化。
样品净化
取上述待净化液2 ml，加入到pep plus萃取柱中，前0.5 ml流出液弃去，收集剩余的上样流出液。取出0.5 ml收集液，向其中加入0.5 ml水，混匀后，过0.22 µm nylon针式过滤器待检测。
基质混合标准工作溶液配制
取高浓度混合标准溶液，用空白样品基质溶液制成基质混合标准工作溶液。
色谱条件
色谱柱：venusil mp c18，3 µm，100 å，3.0 × 50 mm；
流动相a：水；
流动相b：乙腈；
柱温：30℃；
进样量：5 µl；
流速：0.4 ml/min；
表2. 液相色谱梯度洗脱条件
时间/min | 流速/ml/min | a% | b% |
0.5 | 0.4 | 45 | 55 |
1.0 | 0.4 | 20 | 80 |
4.0 | 0.4 | 20 | 80 |
4.5 | 0.4 | 45 | 55 |
7.0 | 0.4 | 45 | 55 |
质谱条件
离子源：esi-；电喷雾电压：-4500 v；雾化气压力：45 psi；气帘气压力：15 psi；辅助气压力：50 psi；离子源温度：450℃；采集方式：多反应监测(mrm)。
表3. 氟虫腈及其代谢物质谱参数
物质名称 | q1 | q3 | dp/v | ce/v |
氟虫腈 | 435 | 330 | -60 | -22 |
399 | -60 | -15 | ||
氟甲腈 | 387 | 351 | -65 | -16 |
282 | -65 | -45 | ||
氟虫腈砜 | 451 | 282 | -75 | -37 |
244 | -75 | -61 | ||
氟虫腈亚砜 | 419 | 383 | -64 | -18 |
262 | -64 | --39 |
注：下划线为定量离子。
结果与讨论
实验结果
由表4可知，采用固相萃取结合lc-ms/ms的方法检测鸡蛋和蛋糕中的氟虫腈及其3种代谢物，加标回收率在80% ~ 115%之间，能够满足检测要求。由图1 ~ 图3可知，用venusil mp c18色谱柱检测氟虫腈及其代谢物，峰形良好，保留时间稳定。
表4.鸡蛋和蛋糕基质加标回收实验结果(添加水平4 µg/kg，n=3)
物质名称 | 保留时间/min | 鸡蛋 | 蛋糕 | ||
平均回收率/% | rsd/% | 平均回收率/% | rsd/% | ||
氟虫腈 | 3.58 | 101.6 | 7.1 | 95.9 | 6.2 |
氟甲腈 | 3.75 | 104.0 | 7.2 | 85.8 | 4.2 |
氟虫腈砜 | 3.96 | 112.8 | 7.0 | 96.0 | 2.5 |
氟虫腈亚砜 | 3.99 | 111.4 | 5.1 | 83.0 | 8.0 |
实验谱图
图1. 0.001 µg/ml 氟虫腈标准溶液色谱图
图2. 4 µg/kg鸡蛋基质加标色谱图
图3. 4 µg/kg蛋糕基质加标色谱图
结论
本实验建立了鸡蛋和蛋糕中氟虫腈及其3种代谢物的前处理方法，并结合lc-ms/ms对加标量为4 µg/kg的样品进行了检测。结果表明，使用cleanert pep plus固相萃取小柱对鸡蛋和蛋糕基质进行净化，氟虫腈及其代谢物的加标回收率在80% ~ 115%之间，且rsd小于10%。说明cleanert pep plus小柱可以用于鸡蛋和蛋糕中氟虫腈及其代谢物的净化。
附：相关产品
产品名称 | 规格描述 | 包装数量 | 订货号 |
cleanert pep plus | 60 mg/3 ml | 50支/包 | pe0603x |
venusil mp c18 | 3 µm，100 å，3.0 × 50 mm | 1支 | va930503-0 |
nylon针式过滤器 | 单膜，13 mm，0.22 µm | 200个/包 | as021320 |
一次性注射器 | 2 ml无针头 | 100支/包 | lzsq-2ml |
1.5 ml样品瓶 | 短螺纹透明带书写处 32 × 11.6 mm | 100/pk | 1109-0519 |
1.5 ml样品瓶盖 | 9 mm中心孔蓝盖，红色橡胶/米色ptfe隔垫 45°shore a; 1.0 mm | 100/pk | 0915-1819 |